膽汁酸定量分析
Bile Acids Quantitative Analysis
膽汁酸概述
膽汁酸(bileacid)是一大類膽烷酸的總稱,在脂肪代謝中起著重要作用。膽汁酸的生理功能可概括為:影響膽汁分泌、促進(jìn)腸道對脂類物質(zhì)的吸收并影響腸道功能。膽汁酸作為消化液的組成部分之一是由肝合成并隨膽汁排入腸內(nèi),促進(jìn)對脂類物質(zhì)的消化和吸收。主要包括膽酸、鵝去氧膽酸、脫氧膽酸、石膽酸、熊去氧膽酸等及其甘氨酸和牛磺酸結(jié)合型。肝分泌到膽汁中的膽汁鹽是強(qiáng)有力的乳化劑,膽汁流經(jīng)小腸上部后,膽汁鹽乳化脂肪,助其消化吸收。在乳化脂肪小滴的脂肪酸和甘油酯被小腸下部吸收以后,膽汁鹽也被重吸收。它們回到肝并被重新使用,因此,膽汁鹽總在肝和小腸間循環(huán)。腸道中大量的微生物會對這種肝腸循環(huán)產(chǎn)生影響。主要的影響菌類有乳酸菌、雙歧桿菌、腸桿菌、擬桿菌和梭狀芽孢桿菌。這些菌通過影響宿主膽汁酸的種類和含量,進(jìn)而對諸如膳食脂肪和脂溶性維生素的吸收,促進(jìn)脂質(zhì)吸收,保持腸道屏障功能,信號系統(tǒng)內(nèi)分泌功能,并能夠在一定程度上調(diào)節(jié)甘油三脂、膽固醇、葡萄糖和能源體內(nèi)平衡。
我們采用LC-MS/MS技術(shù)平臺可對40種膽汁酸絕對定性定量分析,確保多種同分異構(gòu)體獲得較好的分離,并采用具有代表性的同位素膽汁酸作為內(nèi)標(biāo)校正,顯著提高定性定量檢測的準(zhǔn)確性。本方法具有優(yōu)異的靈敏度、精密度、重復(fù)性及準(zhǔn)確性,可用于探索膽汁酸在各種疾病中的病因?qū)W、發(fā)病機(jī)理中所發(fā)揮的作用,挖掘其在疾病診斷、治療及預(yù)后過程中的重要價值。目前完成樣本數(shù)量為800+。
檢測列表

案例解析
組織和血清代謝物分析揭示了人類肝癌的潛在生物標(biāo)志物
研究目的:肝細(xì)胞癌(HCC)是一種異質(zhì)性代謝紊亂的惡性腫瘤,缺乏有效的生物標(biāo)志物進(jìn)行監(jiān)測和診斷。本研究我們使用組織和血清代謝組學(xué)方法尋找肝癌潛在的代謝物生物標(biāo)志物。
方法:選取肝癌患者的肝組織樣本和90個血清樣本(30個HCC患者、30個肝硬化患者、30個健康樣本),采用LC-MS進(jìn)行單因素和多因素分析。
結(jié)論
1.肝細(xì)胞癌組織和血清標(biāo)本中共檢出六種代謝物,分別chenodeoxycholic acid (CDCA), glycocholic acid (GCA), LPC20:5, LPE18:0, succinyladenosine and uridine。
2.采用CDCA、LPC20:5、succinyladenosine和uridine建立基于logistic回歸的診斷模型。四代謝物物將肝癌(HCC)與肝硬化區(qū)分開來,AUC評分為0.938,敏感性為93.3%,特異性為86.7%。說明CDCA、LPC20:5、succinyladenosine、uridine聯(lián)合應(yīng)用可作為提高HCC敏感性和特異性的生物標(biāo)志物。
參考文獻(xiàn):Jun Hana, Wen-xingQin,et al. Tissue and serum metabolite profiling reveals potential biomarkers ofhuman hepatocellular carcinoma[J].ClinicaChimica Acta,2019,488:68-75.
技術(shù)優(yōu)勢
特異性:適宜的樣本前處理方法,充分提取樣本中膽汁酸物質(zhì);
定性定量準(zhǔn):構(gòu)建標(biāo)品數(shù)據(jù)庫,每個物質(zhì)選擇合適的離子對進(jìn)行定量檢測,確保定性定量準(zhǔn)確。
技術(shù)參數(shù)
檢測平臺:AB Sciex 6500+ 、4000 LC-MS/MS
樣本類型及需求量:血清、血漿≥20ul
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 動物及臨床組織樣本≥20mg
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 糞便≥20mg
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 膽汁酸≥20ul
樣本的保存:液氮或-80℃保存